БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ НЕКОТОРЫХ ИЗБРАННЫХ ASPERGILLUS SPP. (THE BIOLOGICAL PECULIARITIES OF SOME SELECTED ASPERGILLUS SPP.)

Author: Игнатьева С.М.1, Бабенко Г.А.1, Гурьева А.С.2, Галкина П.К.2, Спиридонова В.А.1

Ignatyeva S.M1., Babenko G.A.1, Gurieva A.S.2, Galkina P.K.2, Spiridonova V.A.1

Author address:

1НИИ Медицинской микологии им. П.Н.Кашкина ГОУ ДПО СПб МАПО; 2Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия

Kashkin Research Institute of Medical Mycology of SEI APE SPb MAPE; State University, Saint Petersburg, Russia

Full conference title:

RUSSIAN-CHINESE SCIENTIFIC-PRACTICAL CONFERENCE ON MEDICAL MICROBIOLOGY AND CLINICAL MYCOLOGY (XII KASHKIN READING)

Date: 22 July 2016

Abstract:

Цель исследования – изучить биологические свойства метаболитов некоторых микромицетов рода Aspergillus, имеющих медицинское значение.

Материалы и методы. Объектами исследования были 4 вида Aspergillus из Российской коллекции грибов НИИ медицинской микологии: A. fumigatus шт. ВКПГУ -1168, A. flavus шт. ВКПГУ-1071, A. niger шт. ВКПГУ – 1085, A. nidulans шт. ВКПГУ – 44/227. Глубинное культивирование выбранных штаммов грибов проводили на жидкой питательной среде Чапека-Докса с 2% глюкозы в течение 30 дней при температуре 27 °С. Посевной материал (105-107 спор/мл) помещали в качалочные колбы со средой и встряхивали на шуттель-аппарате в течение всего срока ферментации. На разных сроках выращивания биомассу грибов отделяли центрифугированием при 3000 об/мин. в течение 15 мин., а в нативном растворе определяли величину рН, содержание белка, фосфолипазную (чашечный метод с 2% лецитином) и протеолитическую активности (колориметрический метод с 2% казеином). Наличие галактоманнана определяли с помощью иммуноферментной тест-системы «Platelia Aspergillus EIA» (фирма «Bio-Rad», США).

Результаты. Все виды Aspergillus spp. продуцировали галактоманнан на ранних сроках выращивания с максимальной концентрацией его на 2 сутки ферментации. В процессе культивирования Aspergillus spp. выделяли внеклеточные белковые метаболиты, обладающие фер-
ментативной активностью. При этом первыми секрети-ровались фосфолипазы (на 3-5 день культивирования), а синтез протеаз начинался позже (на 7-10 сутки). Наибольшей фосфолипазной активностью обладали виды A. niger и A. fumigatus, продуцирующие ферменты на протяжении всего срока выращивания грибов, в отличие от видов A. nidulans и A. flavus, у которых фосфолипазы обнаруживали только на ранних стадиях культивирования.

При исследовании протеолитической активности у видов Aspergillus spp., выявили, что A.fumigatus, A. flavus, A. nidulans и A. niger способны к продукции протеаз, имеющих различный оптимум активности. Наибольшим набором (4 типа) ферментов с широким диапазоном действия от 2,5 до 9,5 обладал A. fumigatus, который один из всех видов аспергиллов секретировал щелочную протеазу с оптимумом активности при рН 9,5. Наличие у A.fumigatus ферментов с широким спектром действия, по-видимому, обусловливает его способность гидролизовать многие субстраты. У A. flavus выявили 2 кислые протеазы с оптимумом активности при рН 2,5; 5,5 и одну нейтральную про-теазу с оптимумом активности при рН 7,2. Активности 3-х протеаз у A. niger были максимальными при рН 2,5; 5,5 и 7,2, в то время как A. nidulans секретировал только 2 кислые протеазы (при рН 2,5 и 5,5) и не продуцировал нейтральные протеиазы.

Выводы. Глубинное культивирование Aspergillus spp. оказалось хорошей моделью для изучения динамики метаболизма возбудителей аспергиллезной инфекции и понимания ее патогенетических механизмов. В процессе клеточного роста штаммы Aspergillus spp. отличались своеобразием развития, выделяя в питательную среду биологически-активные вещества полисахаридной и белковой природы. На ранних сроках выращивания грибов (2 сутки) синтезировался внеклеточный галактоманнан, с 3 суток начиналась секреция фосфолипаз, а с 7 суток -протеаз. Виды Aspergillus spp. характеризовались продукцией индивидуального набора протеаз, их активностью в различных диапазонах рН и временем максимальной секреции. Щелочная протеаза была видоспецифична для A.fumigatus.

Conference Year: 2009

Link Conference abstract: 

Conference website

Conference abstracts, posters & presentations

Showing 10 posts of 17130 posts found.
  • Title

    Author

    Year

    Number

    Poster


Our sponsors